Chlorhydrate de guanidine - Repliage des protéines, protéine solubilisante

        Dans le processus de renaturation des protéines, la protéine du corps d'inclusion doit d'abord être dissoute. La protéine du corps d'inclusion fait référence à l'agrégation de protéines exprimées par les bactéries dans les cellules pour former des particules solides inactives, qui sont amorphes et insolubles dans l'eau, et ne se dissolvent que dans des dénaturants tels que l'urée etchlorhydrate de guanidine.

Ensuite, l'agent dénaturant est lentement retiré pour restaurer la protéine cible de l'état dénaturé complètement étiré à la structure repliée normale, tandis que l'agent réducteur est retiré pour permettre la formation normale de liaisons disulfure. En général, le processus de renaturation dechlorhydrate de guanidinecommence à 4M et se termine à 1,5M. Il existe plusieurs méthodes différentes :

Dilution et repliement : ajouter directement de l'eau ou du tampon pour diluer la solution et laisser reposer une nuit pour faire précipiter la protéine. L'inconvénient est que le volume augmente fortement, la vitesse de dilution du dénaturant est trop rapide, et il est difficile à contrôler ; repliement de dialyse ou d'ultrafiltration : les deux dénaturants De petites substances moléculaires peuvent progressivement pénétrer dans la membrane poreuse pendant la dialyse ou l'ultrafiltration, de sorte que la concentration en dénaturant de la solution de protéine dénaturée est progressivement réduite, et finalement éliminée, de sorte que la protéine dénaturée est repliée et repliée. L'avantage est qu'il n'augmente pas le volume. Le taux d'élimination du dénaturant est contrôlé en réduisant progressivement la concentration du perméat externe, mais le processus est lent et prend du temps ; renaturation sur colonne : La renaturation est réalisée dans le processus chromatographique, qui a été étudié et avec succès récemment. Méthode de repliage utilisée en production. L'avantage est que la capacité d'adsorption de la fixation chromatographique est relativement faible par rapport à la protéine dénaturée, ce qui peut améliorer la qualité du repliement et le rendement d'activité ; en même temps, il peut également séparer la protéine cible et la protéine d'impureté pour atteindre le but de la purification ; et il est commode de récupérer le dénaturant.

La protéine est une macromolécule biologique liée à la vie, une substance indispensable pour maintenir le déroulement normal de la vie, et c'est aussi le code d'héritage de la vie de deuxième génération. Diverses recherches sur les protéines sont également des sujets d'intérêt plus grand pour les gens, et la recherche sur sa structure est également très importante pour l'avancement de la médecine. La dénaturation ou la renaturation des protéines est l'une des questions centrales de la recherche en sciences de la vie. Parmi eux, le dénaturantchlorhydrate de guanidinepeut non seulement dénaturer la protéine, faciliter l'étude de sa structure, mais également dissoudre la protéine du corps d'inclusion pendant le processus de renaturation. A joué un rôle essentiel dans la recherche.