Le thiocyanate de guanidine 593-84-0 facilite l'extraction de nucléotides et de peptides à partir de viscères animaux

Thiocyanate de guanidine | 593-84-0 | est un puissant dénaturant des protéines. C'est une poudre cristalline blanche, irritante et sensible à la lumière. Il est soluble dans l'éthanol et l'eau, avec un point de fusion de 118℃. Le thiocyanate de guanidine est principalement utilisé pour la dénaturation, lyse des cellules et extraction de l'ARN et de l'ADN. C'est un composant chimique commun pour l'extraction d'acide nucléique.

Le brevet cn111500664a décrit un procédé d'extraction de nucléotides et de polypeptides à partir de viscères d'animaux à l'aide de thiocyanate de guanidine. Les nucléotides sont des composés composés de base de purine ou de base de pyrimidine, de ribose ou de désoxyribose et d'acide phosphorique, qui sont largement utilisés en médecine, dans les produits mère-enfant, les condiments et les additifs alimentaires. Le polypeptide est Î- Les composés formés d'acides aminés liés entre eux par des liaisons peptidiques sont des produits intermédiaires de l'hydrolyse des protéines, impliquant divers domaines des hormones humaines, des nerfs, de la croissance cellulaire et de la reproduction. Leur importance réside dans la régulation des fonctions physiologiques de divers systèmes et cellules du corps, l'activation des enzymes pertinentes dans le corps, la promotion de la perméabilité de la membrane métabolique intermédiaire, ou le contrôle de la transcription de l'ADN ou l'incidence sur la synthèse de protéines spécifiques, produisent éventuellement des effets physiologiques spécifiques.

Les viscères animaux sont riches en nucléotides et peptides, mais à l'heure actuelle, l'extraction des nucléotides et des peptides est principalement réalisée séparément, ce qui entraîne un gaspillage de ressources et des processus complexes. Le thiocyanate de guanidine est utile pour extraire les nucléotides et les peptides des viscères d'animaux. Les méthodes spécifiques sont les suivantes :

Tout d'abord, lavez les viscères des animaux frais, égouttez-les, hachez-les, puis écrasez-les, ajoutez de l'eau déminéralisée pour obtenir la solution mélangée, puis ajoutez une solution de thiocyanate de guanidine à la solution mélangée, vibrez et mélangez bien, puis laissez reposer. Ensuite, un support contenant de la silice y est ajouté, car le thiocyanate de guanidine clivera les cellules et les nucléotides libérés des cellules seront combinés avec le support de silice. Sortir le support contenant de la silice, l'absorber et le séparer avec un éluant pour obtenir des nucléotides purifiés.

Ensuite, une solution de NaCl est ajoutée à la solution résiduelle à partir de laquelle le support de silice a été retiré, la solution mixte est extraite, puis la protéase composite est ajoutée, puis une hydrolyse enzymatique par micro-ondes est effectuée, la solution d'hydrolyse enzymatique est chauffée dans un bain-marie , centrifugé, le surnageant est prélevé, et le polypeptide est obtenu après lyophilisation.

Cette méthode utilise les caractéristiques selon lesquelles le thiocyanate de guanidine peut détruire la structure cellulaire et dénaturer la protéine. Il peut non seulement extraire successivement des nucléotides et des peptides, mais présente également les avantages d'une méthode simple et d'une efficacité élevée. En même temps, cela évite également le problème de réaction entre les réactifs biochimiques lors de l'ajout de réactifs biochimiques pour l'extraction.